產品詳情
- 產品編號: T0789
- 包裝規格: 1×10⁶ 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 肝臟
- 捐贈者背景: 胎兒來源
- 細胞類型: 永生化肝前驅細胞
- 形態特徵: 貼附型,紡錘狀
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: 液態氮氣相(< -130°C)
- 運輸條件: 乾冰運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
概述
永生化人類胎肝細胞 (cBAL111) 提供穩定的肝臟研究模型。這些細胞來自人類胎兒造血細胞,並透過慢病毒介導的人類端粒酶逆轉錄酶 (hTERT) 過表達進行永生化。它們保留了肝特異性標記,包括白蛋白 (albumin)、麩氨酰胺合成酶 (glutamine synthetase)、角蛋白 18 (cytokeratin 18) 及膽管細胞標記角蛋白 19 (cytokeratin 19)。這些特性使其非常適合用於肝臟生物學研究、疾病建模及藥物篩選應用。
主要特點與優勢
- 長期存活能力: 慢病毒介導的 hTERT 永生化確保細胞長時間培養。
- 高重複性: 能提供穩定且一致的實驗結果。
- 肝特異性標記表達: 表達關鍵的肝蛋白,確保肝功能研究的可靠性。
- 優化生長條件: 針對特定培養基和細胞外基質進行適應,提高細胞存活率。
- 貼附型生長特性: 便於培養操作與維護。
培養與操作指南
建議培養條件
- 培養基底塗層: 建議使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或細胞外基質 (G422) 塗層培養容器以增強細胞貼附能力。
- 培養基: PriGrow III (TM003) 並添加:
- 熱滅活 10% 胎牛血清 (FBS)
- 2 mM L-麩氨酰胺 (G275)
- 1 µM 地塞米松 (dexamethasone)
- 1X ITS-G (Gibco)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
- 培養條件: 37°C,5% CO₂ 濕潤環境。
- 接種密度: 20,000 – 40,000 細胞/cm²
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞(最長不超過 2 分鐘),確保瓶蓋保持在水面以上避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭外部進行消毒,然後轉移至生物安全櫃內操作。
- 將解凍後的細胞轉移至 15mL 無菌離心管,加入 5mL 預熱的完整培養基。
- 以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸取上清液,小心重懸細胞沉澱於新鮮的完整培養基中,並接種至預塗層的 T25 培養瓶。
- 按推薦條件培養,待細胞恢復生長後再進行傳代。
傳代培養指南
- 吸取舊培養基並以 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液,置於 37°C 培養箱內,直到細胞脫落 (~2-10 分鐘)。
- 加入等體積完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 以 125xg 離心 5 分鐘,吸取上清液,並將細胞重懸於新鮮培養基中。
- 按適當密度接種至新培養容器中。
- 按推薦條件培養,觀察細胞融合度。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液: 10% DMSO 在完整培養基中。
- 冷凍速率: 以 -1°C 每分鐘的速率降溫,然後轉移至液態氮儲存。
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免責聲明
- 本產品僅供 研究使用,不得用於人類或臨床應用。
- 所提供的生長參數已於標準實驗室條件下驗證,具體細胞行為可能因不同條件而有所變化。
- 購買本產品即表示同意材料轉讓協議 (MTA) 條款。請聯繫我們瞭解許可與適用範圍。
- 為確保細胞最佳活性,建議採用活細胞運輸。請根據地理位置及環境條件評估其可行性。
- 雖然我們致力於提供準確資訊,但不保證在未驗證條件下的性能表現,所有銷售均為最終交易。
參考文獻
- Deurholt, Tanja, et al. “In vitro functionality of human fetal liver cells and clonal derivatives under proliferative conditions.” Cell transplantation 15.8-9 (2006): 811-822.
- Poyck, Paul PC, et al. “Evaluation of a new immortalized human fetal liver cell line (cBAL111) for application in bioartificial liver.” Journal of hepatology 48.2 (2008): 266-275.
- Norton, Pamela, et al. “Development and application of a novel recombinant Aleuria aurantia lectin with enhanced core fucose binding for identification of glycoprotein biomarkers of hepatocellular carcinoma.” Proteomics 16.24 (2016): 3126-3136.