產品詳情
- 產品編號: T0843
- 包裝規格: 1×10^6 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 血液
- 細胞類型: 永生化肥大細胞
- 生長特性: 懸浮生長；可能附著於非直立式培養容器
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: 液態氮氣相或低於 -130°C
- 運輸條件: 乾冰運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
- 培養條件: 37°C，5% CO₂
- 永生化方法: 自發性
概述
永生化人類肥大細胞 (LUVA) 是由造血幹細胞衍生的非基因修飾細胞株，能夠在無外源生長因子的條件下持續增殖，同時保有肥大細胞的主要標誌，如胰蛋白酶 (tryptase)、高親和性 IgE 受體 (FcεRI) 和 c-kit。LUVA 細胞可透過 FcεRI 交聯刺激釋放β-己糖苷酶 (β-hexosaminidase) 和前列腺素 D2 (prostaglandin D2)，是研究過敏反應、免疫訊號傳導及藥物開發的理想工具。
主要特點與優勢
-
- 無需額外生長因子: 可在無外源生長因子條件下穩定增殖。
- 典型肥大細胞標誌: 表達 tryptase、FcεRI 和 c-kit。
- FcεRI 依賴性釋放反應: 可透過交聯 FcεRI 釋放β-己糖苷酶和前列腺素 D2。
- 穩定性高，實驗可重現: 保持穩定表型，確保研究數據的一致性。
- 適用於藥物篩選: 可用於評估針對肥大細胞活化和過敏反應的藥物。
培養與操作指南
建議培養條件
-
- 培養器皿: 建議使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 以維持最佳生長環境。
- 培養基: PriGrow X Series 培養基 (TM0843) 添加：
- 2 mM L-谷氨醯胺 (G275)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
- 培養環境: 37°C，5% CO₂ 濕潤培養箱。
- 接種密度: 100,000 – 300,000 細胞/ml。
- 倍增時間: 約 24-48 小時。
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍小瓶 (最多 2 分鐘)。
- 使用 70% 酒精消毒小瓶外部，然後轉移至生物安全櫃內。
- 將解凍後的細胞懸浮液轉移至 15 ml 無菌離心管中，並加入 5 ml 預熱的完整培養基。
- 以 125xg 離心 5 分鐘，棄去上清液，輕輕重懸細胞於新鮮培養基中。
- 轉移細胞至直立式 T25 培養瓶，並於建議條件下培養。
傳代培養指南
- 每 2-3 天更換培養基。
- 當細胞密度達到最佳狀態時，以 1:2 至 1:10 的比例轉移至新培養瓶。
- 以 125xg 離心 5 分鐘，重懸於新鮮培養基中，並接種至新培養瓶。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液：使用完整培養基 (TM0843) 添加 8% DMSO 進行冷凍保存。
冷凍過程：以 -1°C/分鐘的速率緩慢降溫，然後轉移至液態氮儲存。
相關產品
- 重組人類 SCF (E. coli) – Z100815
- 重組人類 TGF Beta-1 (TGFB1) – Z101555
- 重組人類 TNF – Z101385
免責聲明
- 本產品僅供研究使用， 不得用於人類或動物的診斷、治療或臨床應用。
- 使用者需確認本產品是否適用於其特定的實驗條件。
- 處理與使用本產品時，應遵循所有相關的生物安全法規。
- 本公司不提供任何明示或暗示的擔保，針對本產品於推薦條件之外的應用不承擔任何責任。
參考文獻
-
- Kirshenbaum, Arnold S., et al. “Demonstration that human mast cells arise from a progenitor cell population that is CD34+, c-kit+, and expresses aminopeptidase N (CD13).” Blood, The Journal of the American Society of Hematology 94.7 (1999): 2333-2342.
- Kirshenbaum, Arnold S., et al. “Characterization of novel stem cell factor responsive human mast cell lines LAD 1 and 2 established from a patient with mast cell sarcoma/leukemia; activation following aggregation of FcεRI or FcγRI.” Leukemia research 27.8 (2003): 677-682.
- Laidlaw, Tanya M., et al. “Characterization of a novel human mast cell line that responds to stem cell factor and expresses functional
