產品詳情
- 產品編號: T0429
- 包裝規格: 1×10^6 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 肝臟
- 捐贈者資訊: 女性，來源於肝腫瘤患者的正常肝組織
- 細胞類型: 永生化肝臟星狀細胞
- 生長特性: 貼附型
- 永生化方式: Lenti-hTERT-Neo 病毒與 Lenti-SV40 病毒轉導
- 表達標記: PDGFRB、GFAP、Desmin、Nestin、α-SMA、I 型膠原蛋白
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: 低於 -130°C (液態氮氣相)
- 運輸條件: 乾冰運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
概述
永生化人類肝臟星狀細胞株 (LSC-1) 是一種經過嚴格表徵的細胞模型，具有穩定的基因背景，可長期培養並保留肝臟星狀細胞的關鍵特性。該細胞適用於肝病研究、纖維化建模與抗纖維化藥物篩選。LSC-1 細胞表現纖維化基因，並能根據不同的培養條件轉換為活化或靜止狀態，為動態肝病研究提供高價值的研究工具。
主要特點與優勢
- 纖維化研究: 幫助解析纖維化信號傳導與細胞外基質重塑機制。
- 藥物開發與毒性測試: 適用於抗纖維化藥物篩選及肝毒性評估。
- 3D 培養與共培養: 在特定條件下可回復至靜止樣表型，適合肝臟動態模型研究。
- 高穩定性: 維持穩定基因背景，確保實驗數據的一致性。
- 最佳化培養條件: 經特定培養基配方優化，提高細胞活力與可用性。
培養與操作指南
建議培養條件
- 培養基底塗層：建議使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422) 以增強細胞貼附能力。
- 培養基：PriGrow IX 培養基 (TM019)，並添加：
- 10% 胎牛血清 (FBS)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
- 培養條件：37°C，5% CO₂ 濕潤環境
- 接種密度：10,000 – 15,000 細胞/cm²
- 倍增時間：約 48 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞 (最長不超過 2 分鐘)，並輕輕搖動以確保均勻解凍。確保瓶蓋保持在水面以上，以避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭外部進行消毒，接下來的所有操作應在生物安全櫃內於無菌條件下進行。
- 將細胞懸浮液轉移至 15 mL 無菌錐形管中，並加入 5 mL 預熱的完整培養基，然後以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸取上清液，小心地將細胞沉澱重懸於新鮮的預熱完整培養基中。
- 將細胞分配至 T25 培養瓶，並按照建議的培養條件進行培養。
傳代指南
- 吸取舊培養基，並用 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱的 0.05% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，置於 37°C 培養箱內，直至細胞脫落 (約 2-10 分鐘)。顯微鏡下觀察確認細胞已脫落。
- 加入等體積的完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 將細胞懸浮液轉移至無菌離心管中，並以 125xg 離心 5 分鐘。
- 吸取上清液，並將細胞沉澱重懸於新鮮培養基中。
- 按適當密度接種至新培養容器中，並在推薦條件下培養。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液：TM024 或完整培養基添加 10% DMSO。
- 冷凍方法：以每分鐘 -1°C 的速率降溫，然後轉移至液態氮儲存。
相關產品
- 重組人類 TGF-β1 – Z101555)
- 重組人類結締組織生長因子 (CTGF) – Z102025)
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免責聲明
- 本產品僅供研究使用，不得用於診斷、治療或臨床應用。
- 使用者應確保本產品適用於其特定應用。
- 細胞應在 BSL-2 生物安全等級下操作，並遵循相關機構規範。
- 本產品不提供任何超出規格範圍的性能保證。
參考文獻
-
- Lee, Ho‐Joon, et al. “In vitro modeling of liver fibrosis with 3D co‐culture system using a novel human hepatic stellate cell line.” Biotechnology and Bioengineering 120.5 (2023): 1241-1253.
