永生化人類肝細胞 – HPV E6/E7, hTERT & MycT58A

一種可靠的體外模型,適用於研究肝臟代謝、肝毒性及細胞增殖。

分類

產品詳情

  • 產品編號:T0063
  • 規格:1×10^6 細胞 / 1.0 ml
  • 物種:人類 (Homo sapiens)
  • 組織來源:肝臟
  • 細胞類型:永生化肝細胞
  • 生長特性:貼附型,上皮樣
  • 永生化方式:透過 HPV E6/E7、hTERT & MycT58A 的慢病毒轉導進行永生化
  • 表達標記:Beta-2 microglobulin
  • 生物安全等級:BSL-2
  • 儲存條件:-130°C 以下 (液態氮氣相)
  • 運輸方式:乾冰運輸
  • 產品形式:冷凍保存細胞

概述

永生化人類肝細胞 (IHH) 提供穩定且可重複的肝臟研究系統,適用於藥物代謝、毒性評估及肝細胞生物學研究。此細胞經過特殊工程設計,能夠長期培養並維持關鍵的肝細胞功能。

主要特點與優勢

  • 穩定的肝細胞模型: 提供可重複的肝臟研究系統。
  • 增殖能力提升: 克服原代肝細胞短期培養的限制。
  • 適用於藥物篩選與毒理學研究: 為製藥及毒理學應用提供理想平台。
  • 支持 3D 培養與共培養: 促進組織工程及肝病模型研究。
  • 保留肝臟標誌物表達: 維持肝細胞的關鍵代謝與運輸特性。

培養與操作指南

建議培養條件

  • 基底塗層: 建議使用 PriCoat™ ECM T25 培養瓶 (G999) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422),以增強細胞貼附能力。
  • 培養基: PriGrow IX (TM019) 補充以下成分:
    • 10% 胎牛血清 (FBS)
    • 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
  • 培養條件: 37°C,5% CO₂ 濕潤環境
  • 接種密度: 30,000 細胞/cm²
  • 倍增時間: 30–35 小時

解凍步驟

  1. 在 37°C 水浴中快速解凍細胞 (最長不超過 2 分鐘),並確保瓶蓋保持在水面以上,以避免污染。
  2. 使用 70% 酒精噴灑並擦拭瓶外部進行消毒,然後轉移至生物安全櫃內操作。
  3. 將解凍後的細胞懸浮液轉移至無菌 15mL 離心管,加入 5mL 預熱的完整培養基。
  4. 以 125xg 離心 5–7 分鐘。
  5. 吸取上清液,將細胞沉澱重懸於新鮮的完整培養基中,並接種至預塗層的 T25 培養瓶,按推薦條件培養。

傳代指南

  1. 吸取培養基,並用 PBS 清洗細胞。
  2. 加入 2–3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液,置於 37°C 培養箱中,直到細胞脫落 (~2–10 分鐘)。
  3. 加入等體積的完整培養基中和胰蛋白酶。
  4. 以 125xg 離心 5 分鐘,吸取上清液,將細胞沉澱重懸於新鮮培養基中。
  5. 按適當密度接種至新培養容器,並按推薦條件培養。

冷凍保存指南

  • 冷凍保存液: 冷凍保存液 (TM024) 或完整培養基加 10% DMSO。
  • 冷凍方法: 以 -1°C 每分鐘的速率降溫,然後轉移至液態氮儲存。

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免責聲明

  1. 本產品僅供研究用途,未獲批准用於人體或動物治療。

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