產品詳情
- 產品編號: T0054
- 包裝規格: 1×10⁶ 細胞 / 1.0 mL
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 肝臟
- 細胞類型: 永生化肝細胞
- 生長特性: 貼附型，上皮樣形態
- 永生化方式: 透過 Lentivirus 轉導 HPV E6/E7、hTERT & MycT58A
- 表達標誌: AAT1、CK8、CK18、CYP1A1 (穩定表達)、CYP1A2 (可誘導表達)、CYP2C9 (可誘導表達)
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: -130°C 以下 (液態氮氣相)
- 運輸方式: 乾冰運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
概述
永生化人類肝細胞 (HPV E6/E7, hTERT & MycT58A) 提供了一種可長期培養的可靠模型，適用於肝臟代謝、藥物毒性篩選與疾病機制研究。由於其穩定的基因背景與優化的培養條件，使其成為肝臟研究的重要工具。
主要特點與優勢
- 長期穩定性: 可在多次傳代後維持肝細胞特性。
- 高度重複性: 確保實驗數據的穩定性與一致性。
- 適用於肝臟研究: 可用於代謝研究、肝細胞增殖與毒性測試。
- 最佳化培養條件: 針對特定培養基與細胞外基質進行優化，提高細胞存活率與活性。
- 貼附型細胞: 方便培養與操作。
培養與操作指南
建議培養條件
- 培養基底塗層： 使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422)，增強細胞貼附能力。
- 培養基： PriGrow IX (TM019)，並添加：
- 10% 胎牛血清 (FBS)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
- 培養條件： 37°C，5% CO₂ 濕潤環境。
- 接種密度： 30,000 細胞/cm²
- 倍增時間： 30 – 35 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞（最多 2 分鐘），確保瓶蓋保持在水面以上以避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭外部消毒，轉移至生物安全櫃內操作。
- 將解凍後的細胞轉移至 15mL 無菌離心管，加入 5mL 預熱的完整培養基。
- 以 125xg 離心 5–7 分鐘。
- 吸取上清液，小心重懸細胞沉澱於新鮮完整培養基中，並接種至預塗層的 T25 培養瓶中。
- 按建議培養條件培養，並觀察細胞恢復生長。
傳代指南
- 吸取舊培養基，並以 PBS 清洗細胞。
- 加入 2–3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA，置於 37°C，直到細胞脫落（2–10 分鐘）。
- 加入等體積完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 以 125xg 離心 5 分鐘，吸取上清液，並將細胞重懸於新鮮培養基中。
- 按適當密度接種至新培養容器，按推薦條件培養。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液： 使用冷凍保存液 (TM024) 或完整培養基添加 10% DMSO。
- 冷凍步驟： 以 -1°C 每分鐘速率降溫，然後轉移至液態氮儲存。
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免責聲明
- 本產品僅供研究使用，未經批准不得用於診斷、治療或臨床應用。
- 使用者應自行確認本產品是否適用於其特定應用。
- 細胞應在 BSL-2 生物安全等級下操作，並遵循相關機構規範。
- 本產品不提供超出所述規格的任何保證。
