產品詳情

• 產品編號： T0056
• 規格： 1×10⁶ 細胞 / 1.0 ml
• 物種： 人類 (Homo sapiens)
• 組織來源： 肝臟
• 捐贈者資訊： 成人
• 細胞類型： 永生化肝竇內皮細胞
• 生長特性： 貼附型，多邊形形態
• 永生化方式： SV40 大 T 抗原的慢病毒轉染
• 表達標誌： CK18、CK19、vWF、CD31、VE-cadherin、嘌呤黴素抗性
• 生物安全等級： BSL-2
• 儲存條件： 低於 -130°C (液態氮氣相)
• 運輸方式： 乾冰運輸
• 產品形式： 冷凍保存細胞

概述

永生化人類肝竇內皮細胞（HSEC）提供了一種穩定的體外模型，用於研究肝臟微血管功能、抗原呈遞與免疫耐受性。這些細胞能夠根據環境變化調節孔隙，對肝臟的穩態與再生至關重要。

主要特點與優勢

• 肝臟免疫與內皮研究： 有助於解析抗原呈遞與免疫調節機制。
• 動態孔隙調控： 可根據環境刺激調整肝內血管的通透性。
• 藥物開發與毒理學研究： 適用於肝毒性藥物及血管標靶療法的測試。
• 穩定與可重複性： 維持穩定的基因背景，確保實驗數據的可靠性。
• 適用於 3D 培養與共培養： 提供更真實的肝病模型與機制研究。

培養與操作指南

建議培養條件

• 培養基底塗層：使用 Applied Cell 細胞外基質 (G422)，於 37°C 孵育過夜，使用前以無菌 PBS 洗滌。
• 培養基：PriGrow IX (TM019) 加入以下成分：
  • 10% 胎牛血清 (FBS)
  • 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
• 培養條件：37°C、5% CO₂ 濕潤環境
• 接種密度：20,000 細胞/cm²
• 倍增時間：12–22 小時

解凍步驟

1. 在 37°C 水浴中快速解凍細胞，同時輕輕搖動小瓶 (最長不超過 2 分鐘)，確保瓶蓋保持在水面以上以避免污染。
2. 使用 70% 酒精噴灑並擦拭小瓶外部，然後轉移至生物安全櫃內操作。
3. 將細胞懸液轉移至含有 5mL 預熱完整培養基的無菌 15mL 離心管中，以 125xg 離心 5–7 分鐘。
4. 吸取上清液，小心重懸細胞沉澱於新鮮完整培養基中，並接種至預塗層的 T25 培養瓶。
5. 按推薦條件培養，待細胞恢復生長後再進行傳代。

傳代指南

1. 吸取培養基，並用無菌 PBS 清洗細胞。
2. 加入 2–3mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，置於 37°C 培養箱內，直到細胞脫落 (~2–10 分鐘)。
3. 加入等體積完整培養基以中和胰蛋白酶。
4. 將細胞懸液轉移至無菌離心管，以 125xg 離心 5 分鐘。
5. 吸取上清液，並將細胞重懸於新鮮培養基中。
6. 按適當密度接種至新培養容器中，按推薦條件培養，觀察細胞融合度。

冷凍保存指南

• 冷凍保存液：使用 Cryopreservation Medium (TM024) 或完整培養基加 10% DMSO。
• 冷凍方法：以 -1°C 每分鐘的速率降溫，然後轉移至液態氮儲存。

相關產品

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免責聲明

• 本產品僅供研究使用，不可用於診斷、治療或臨床應用。
• 使用者需自行確認該產品是否適用於其特定研究需求。
• 細胞需在 BSL-2 生物安全等級條件下操作，並遵循機構規範。
• 本公司不對超出產品規格範圍的表現提供任何保證。

參考文獻

• Jung, Hong-Ryul, et al. “Cell spheroids with enhanced aggressiveness to mimic human liver cancer in vitro and in vivo.” Scientific Reports 7.1 (2017): 10499.
• Lee, Ho-Joon, et al. “Elasticity-based development of functionally enhanced multicellular 3D liver encapsulated in hybrid hydrogel.” Acta Biomaterialia 64 (2017): 67-79.
• Buniatian, Gayane Hrachia, et al. “Antifibrotic effects of amyloid-beta and its loss in cirrhotic liver.” Cells 9.2 (2020): 452.
• Lee, Ho‐Joon, et al. “Optimization of 3D hydrogel microenvironment for enhanced hepatic functionality of primary human hepatocytes.” Biotechnology and Bioengineering 117.6 (2020): 1864-1876.