產品詳情
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- 產品編號: T0280
- 包裝規格: 1 x 10⁶ 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 大腦 (胎兒，18 週胎齡)
- 細胞類型: 永生化星形膠質細胞
- 生長特性: 貼附型, 多極形態
- 永生化方法: 使用 SV40 大 T 抗原進行基因改造，以延長增生時間。
- 表達標記: NF-M、GDNF 和 NGF
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: 液態氮氣相或低於 -130°C
- 運輸條件: 乾冰運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
概述
永生化人類星形膠質細胞 (胎兒, SV40) 是一種穩定且可重複使用的細胞模型，適用於研究星形膠質細胞的生理功能。這些細胞通過 SV40 大 T 抗原的基因永生化處理，確保其長期增殖並保持星形膠質細胞的主要特性。適用於神經發育、神經炎症及神經退行性疾病的研究。
主要特點與優勢
- 長期存活能力: 透過基因永生化技術延長細胞培養時間。
- 高重複性: 在多種實驗應用中提供穩定的結果。
- 適用於神經科學研究: 適合研究星形膠質細胞與神經元的互動、腦損傷反應及神經炎症機制。
- 優化培養條件: 針對特定培養基及細胞外基質進行優化，提升細胞活力。
- 易於培養: 貼附型生長特性便於維護與操作。
培養與操作指南
建議培養條件
- 培養基底塗層： 使用 PriCoat™ ECM T25 培養瓶 (G999) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422) 增強細胞貼附能力。
- 培養基： PriGrow IV (TM004) 補充以下成分：
- 10% 胎牛血清 (FBS)
- 2 mM L-谷氨醯胺 (G275)
- 10 ng/mL 重組人類 EGF (rhEGF, Z100139)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
- 培養條件：37°C，5% CO₂ 濕潤環境。
- 接種密度： 40,000 – 50,000 細胞/cm²
- 倍增時間： 49 – 59 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞，時間不超過 2 分鐘，確保瓶蓋保持在水面以上以避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭瓶外部，然後將其轉移至生物安全櫃中操作。
- 將細胞懸液轉移至含有 5 mL 預熱完整培養基的 15 mL 無菌離心管中。
- 以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 小心吸取上清液，避免干擾細胞沉澱。將細胞沉澱重新懸浮於新鮮預熱的完整培養基中，並接種至預塗層的 T25 培養瓶中。
- 按推薦條件培養，待細胞恢復生長後進行傳代。
傳代指南
- 吸取舊培養基，並使用 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，置於 37°C 培養箱中，直到細胞脫落（約 2-10 分鐘）。
- 加入等體積的完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 將細胞懸液轉移至無菌離心管，以 125xg 離心 5 分鐘。
- 吸取上清液，將細胞沉澱重新懸浮於新鮮培養基中。
- 按適當密度接種至新培養容器中，並按推薦條件培養，觀察細胞融合度。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液：使用冷凍保存液 (TM024) 或完整培養基加 10% DMSO。
- 冷凍方法：以 -1°C 每分鐘的速率降溫，然後轉移至液態氮儲存。。
STR 分析 (短串聯重複序列分析)
- D5S818: 11,13
- D13S317: 12,12
- TH01: 6,9.3
- AMEL: X,X
相關產品
- 重組人類 TGFA – Z101935
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- 重組人類 EGF – Z100139
免責聲明
- 本產品僅供 研究使用，不得用於人類或動物的治療、診斷或食用。
- 培養條件可能因使用者的實驗環境而有所不同，建議先行驗證適用性。
- 所有銷售均為最終交易，若未按照建議的培養條件操作，恕不提供保固。
參考文獻
- Choi, Yong-Joon, et al. “PIN1 transcript variant 2 acts as a long non-coding RNA that controls the HIF-1-driven hypoxic response.” Scientific Reports 9.1 (2019): 10599.
- Dozio, Vito, and Jean-Charles Sanchez. “Profiling the proteomic inflammatory state of human astrocytes using DIA mass spectrometry.” Journal of neuroinflammation 15 (2018): 1-14.
