產品詳情
- 產品編號： T0446
- 包裝規格： 1 x 10⁶ 細胞 / 1.0 mL
- 物種： 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源： 心臟 (心室)
- 細胞類型： 永生化纖維母細胞
- 生長特性： 貼附型，多極
- 生物安全等級： BSL-2
- 儲存條件： 液態氮氣相 (-130°C 或以下)
- 運輸條件： 乾冰運輸
- 產品形式： 冷凍保存細胞
概述
永生化人類心臟成纖維細胞在維持心臟結構與功能方面發揮關鍵作用，通過合成細胞外基質、細胞激素和生長因子來影響心臟的修復與重塑。這些細胞可對心肌損傷做出動態反應，參與疤痕形成、纖維化和肥厚過程。本細胞經 SV40 大 T 抗原的慢病毒轉導進行永生化，使其能夠長時間培養並提高實驗的可重複性，為心臟研究提供了優異的體外模型。
主要特點與優勢
- 長期培養能力： 永生化技術確保細胞可長時間存活，不會衰老。
- 高重複性： 適用於心臟纖維化與重塑研究，確保數據一致性。
- 理想的心臟研究模型： 支持心臟纖維母細胞功能、纖維化及心肌損傷應對研究。
- 適應性佳的生長條件： 已適應特定培養基與細胞外基質，提高細胞活力。
- 貼附型生長特性： 易於處理及維護培養。
培養與操作指南
建議培養條件
- 塗層： 使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422) 以增強貼附能力。
- 培養基： PriGrow IV (TM004) 補充：
- 10% 胎牛血清 (FBS)
- 1mM 非必需氨基酸 (NEAA) (產品編號: TM068)
- 2mM L-谷氨酰胺 (產品編號: G275)
- 5µg/mL 胰島素 (產品編號: TM053)
- 1% 青黴素/鏈黴素 (產品編號: G255)
- 培養條件： 37°C，5% CO₂ 濕潤環境
- 接種密度： 40,000 – 50,000 細胞/cm²
- 倍增時間： 48 – 58 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞 (最長不超過 2 分鐘)，確保瓶蓋保持在水面以上以避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭外部進行消毒，然後轉移至生物安全櫃內操作。
- 將解凍後的細胞轉移至 15mL 無菌離心管，加入 5mL 預熱的完整培養基。
- 以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸取上清液，小心重懸細胞沉澱於新鮮的完整培養基中，並接種至預塗層的 T25 培養瓶。
- 按推薦條件培養，待細胞恢復生長後再進行傳代。
傳代指南
- 吸取舊培養基並以 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，置於 37°C 培養箱內，直到細胞脫落 (~2-10 分鐘)。
- 加入等體積完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 以 125xg 離心 5 分鐘，吸取上清液，並將細胞重懸於新鮮培養基中。
- 按適當密度接種至新培養容器中。
- 按推薦條件培養，觀察細胞融合度。
冷凍保存指南
- 使用冷凍保存液 (TM024) 或完整培養基加 10% DMSO。
- 以 -1°C 每分鐘的速率降溫，然後轉移至液態氮儲存。
相關產品
- 重組人類 FGF2 (E. coli) – Z101455
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免責聲明
- 本產品僅供 研究使用，不得用於人體或動物的治療應用。
- 本產品在不同的培養條件下可能表現不同，使用者需自行驗證其適用性。
- 必須存放於 -130°C 以下以維持細胞活性，任何不當儲存可能影響性能。
- 供應商不對因不當使用本產品所導致的結果負責。
參考文獻
- Dolan, Eimear B., et al. “A bioresorbable biomaterial carrier and passive stabilization device to improve heart function post-myocardial infarction.” Materials science and engineering: C 103 (2019): 109751.
- Gałdyszyńska, Małgorzata, et al. “The stiffness‐controlled release of interleukin‐6 by cardiac fibroblasts is dependent on integrin α2β1.” Journal of Cellular and Molecular Medicine 24.23 (2020): 13853-13862.
