產品詳情
- 產品編號: T0538
- 包裝規格: 1×10⁶ 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 心臟
- 捐贈者資訊: 女性,33 歲,白人,心室
- 細胞類型: 永生化心肌細胞
- 生長特性: 貼附型,多極形態
- 表達標記: GATA-4, ACTN2, ACTN3 和 MYH2
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: 液態氮氣相,或低於 -130°C
- 運輸條件: 乾冰運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
概述
永生化人類心肌細胞 – HPV E6/E7 來源於心室,經由 HPV 16 E6/E7 基因的慢病毒轉導修飾,使其可無限增殖,同時保有心肌細胞的主要特性。此細胞適用於心血管研究,包括藥物篩選、電生理研究及疾病模型應用。
主要特點與優勢
- 長期存活能力: 永生化技術確保細胞可長期培養,不易衰老。
- 高度可重複性: 適用於多次實驗,確保數據一致性。
- 適用於心血管研究: 可用於心肌肥厚、電生理研究及心臟毒性評估。
- 最佳化培養條件: 適應特定培養基與細胞外基質,提高細胞活力。
- 貼附型生長: 便於操作與培養維護。
培養與操作指南
建議培養條件
- 培養基底塗層: 建議使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422),以確保細胞最佳貼附能力。
- 培養基: 使用 PriGrow I (TM001),並添加以下成分:
- 10% 胎牛血清(FBS)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液(G255)
- 培養條件: 37°C,5% CO₂ 濕潤環境
- 接種密度: 10,000 – 20,000 細胞/cm²
- 倍增時間: 18 – 27 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞(最多 2 分鐘),確保瓶蓋保持在水面以上,避免污染。
- 使用 70% 酒精對外部進行消毒,然後將細胞轉移至生物安全櫃內操作。
- 將解凍後的細胞轉移至 15 mL 無菌離心管,加入 5 mL 預熱的完整培養基。
- 以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸取上清液,並將細胞沉澱重新懸浮於新鮮的完整培養基中。
- 接種細胞至 預塗層的 T25 培養瓶,並按照建議條件進行培養。
傳代指南
- 吸取舊培養基,並使用 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液,置於 37°C 培養箱內,直到細胞脫落(2-10 分鐘)。
- 加入等體積的完整培養基中和胰蛋白酶。
- 以 125xg 離心 5 分鐘,吸取上清液,並將細胞重新懸浮於新鮮培養基中。
- 將細胞以適當密度接種至新培養容器中。
- 按建議條件培養並觀察細胞融合度。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液:使用 Cryopreservation Medium (TM024) 或完整培養基添加 10% DMSO。
- 冷凍過程:以 每分鐘 -1°C 的速率降溫,然後轉移至液態氮儲存中。
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免責聲明
- 材料轉讓協議 (MTA): 購買此產品需簽署 MTA。
- 性能驗證: 所提供的測試參數來自標準化條件,不同培養條件可能導致數據變異。
- 僅供研究使用: 本產品僅供研究使用,不得用於臨床診斷或治療用途,廠商不對其他用途負責。
- 品質保證: 自發貨日起 30 天內保證細胞存活,需符合正確存儲與操作條件。
- 資訊準確性: 產品資訊僅供參考,文獻引用不代表資訊經過驗證。
參考文獻
- Kono, Ken, et al. “Development of selective cytotoxic viral vectors for concentration of undifferentiated cells in cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells.” Scientific reports 9.1 (2019): 3630.