產品詳情
- 產品編號： T0539
- 包裝規格： 1×10⁶ 細胞 / 1.0 ml
- 物種： 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源： 心臟（心室細胞）
- 供應者資訊： 女性，33 歲，白種人
- 細胞類型： 永生化心肌細胞
- 生長特性： 貼附型，多極形態
- 永生化方法： 透過 CDK4、hTERT 和 BMI1 的慢病毒轉染
- 表達標記： ACTN2 和 ACTN3
- 生物安全等級： BSL-2
- 儲存條件： -130°C 或液態氮氣相儲存
- 運輸條件： 乾冰運輸
- 產品形式： 冷凍保存（冷凍小管）
- 倍增時間： 15 – 25 小時
- 接種密度： 10,000 – 20,000 細胞/cm²
概述
永生化人類心肌細胞 – CDK4, hTERT, & BMI 提供一個高再現性且可擴增的體外模型，適用於心血管研究。這些細胞經過基因修飾，使其能夠無限增殖，同時保留心肌細胞的特性，非常適合用於功能性研究、電生理分析及心臟毒性評估。
主要特點與優勢
- 長期穩定性：可無限增殖，有效減少培養過程中的變異性。
- 真實的心肌細胞標誌：表達 ACTN2、ACTN3 及嘌呤黴素抗性基因。
- 適用於藥物開發與毒性測試：為心血管藥物與毒性影響評估提供可靠的平台。
- 高重複性與可擴增性：確保多次實驗間的一致性，提高研究效率。
- 貼附型生長：便於細胞培養與影像分析。
培養與操作指南
建議培養條件
- 塗層需求： 建議使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或細胞外基質 (G422) 以促進貼附。
- 培養基： PriGrow I (TM001) 添加：
- 10% 胎牛血清 (FBS)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
- 培養環境： 37°C，5% CO₂。
- 接種密度： 10,000 – 20,000 細胞/cm²
- 倍增時間： 15 – 25 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍小管 (~2 分鐘)，輕輕搖動。
- 使用 70% 乙醇對小管表面進行消毒。
- 將細胞懸液轉移至 15 ml 無菌錐形管中，加入 5 ml 預熱培養基。
- 以 125 x g 離心 5-7 分鐘，去除上清液，重新懸浮於新鮮培養基中。
- 轉移至 T25 培養瓶，置於推薦條件下孵育。
傳代指南
- 當細胞達 80% 匯合時，吸取培養基並加入 2-3 ml 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA。
- 觀察細胞脫落情況 (~2-10 分鐘)；若脫落困難，可於 37°C 培養箱內靜置數分鐘。
- 加入等體積的完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 以 125 x g 離心 5 分鐘，去除上清液並重新懸浮於新鮮培養基中。
- 以適當密度接種至新培養瓶並孵育。
冷凍保存
- 冷凍保存液：使用 Cryopreservation Medium (TM024) 或完整培養基添加 10% DMSO。
- 冷凍過程：以 每分鐘 -1°C 的速率降溫，然後轉移至液態氮儲存中。
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免責聲明
- 僅供研究使用，不得用於人類或動物的消費、治療或診斷用途。
- 所有測試參數均基於標準內部培養條件，可能因實驗室條件不同而有所變動。
- 購買本產品可能需簽署材料轉讓協議 (MTA)。
- 在推薦培養條件下，本產品保證 30 天內細胞活性。
- 若產品未按推薦用途使用，本公司不承擔任何責任。
參考文獻
- Kono, Ken, et al. “Development of selective cytotoxic viral vectors for concentration of undifferentiated cells in cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells.” Scientific reports 9.1 (2019): 3630.
