產品詳細資訊
- 產品編號: T0284
- 單位尺寸: 1 × 10⁶ 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類（Homo sapiens）
- 組織: 大腦
- 捐贈者信息: 8 週胎齡人類腹側中腦
- 細胞類型: 不朽化多巴胺能神經前驅細胞
- 生長特性: 貼附性，具有扁平樹突樣突起
- 表達標記: DAT, VMAT-2, TH, α-SYN 和 β-III tubulin
- 生物安全等級: BSL-2
- 存儲條件: 液氮蒸氣相或低於 -130°C
- 運輸: 乾冰運輸
- 格式: 冷凍保存的細胞
概述
不朽化人類多巴胺能神經前驅細胞（LUHMES） 來源於人類中腦組織，提供了一個穩定且可重現的平台，用於多巴胺能神經元的研究。這些細胞可以分化為神經元樣表型，並表達關鍵標誌物，如 多巴胺轉運蛋白（DAT）、囊泡單胺轉運蛋白（VMAT-2）、酪氨酸羥化酶（TH）和 β-III 微管蛋白。此外，LUHMES 細胞表現出電生理特性，使其成為研究神經發育、神經退行性疾病和神經藥理學的強大體外模型。
主要特性與優勢
- 可靠的分化潛能: 能夠獲得多巴胺能神經元樣表型。
- 電生理特性: 適用於研究神經元功能和突觸活動。
- 一致且可重現的模型: 提供神經發育和神經毒性研究的穩定結果。
- 長期培養穩定性: 透過四環素控制系統進行不朽化，以維持細胞完整性和功能。
- 多用途應用: 適用於神經退行性疾病、神經炎症和藥物測試。
培養與操作指南
推薦培養條件
- 塗層: 使用 50 μg/ml 聚-L-鳥氨酸（PLO） 和 1 μg/ml 纖連蛋白 於 37°C 在無菌水中預處理至少 3 小時。
- 培養基:
- Advanced DMEM/F12（Gibco，產品編號 #12634010）
- 1X N2 補充劑（ThermoFisher Scientific）
- 2 mM L-谷氨酰胺（G275）
- 40 ng/ml 重組人 FGF2（Z101455）
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液（G255）
- 培養環境: 保持 37°C，5% CO₂ 加濕環境
- 接種密度: 50,000 – 100,000 細胞/cm²
- 倍增時間: 30 – 40 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴 中迅速解凍細胞（約 2 分鐘）。保持管帽高於水面以防止污染。
- 使用 70% 乙醇 消毒管外部，然後轉移到生物安全櫃內。
- 將解凍的細胞轉移到 無菌 15mL 圓錐管，加入 5mL 預熱完整培養基，含 10% FBS。
- 以 125 × g 離心 5 分鐘，去除上清液，並用新鮮完整培養基輕柔重懸細胞沉澱。
- 將細胞接種到 預塗層的 T25 培養瓶 並在標準條件下培養。
- 至少 4–5 天內不要更換培養基，確保細胞附著。
亞培養指南
- 吸除舊培養基並用 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱 0.25% 胰蛋白酶-EDTA，在 37°C 培養直到細胞脫離（約 2-10 分鐘）。
- 加入等體積 完整培養基 中和胰蛋白酶。
- 以 125 × g 離心 5 分鐘，去除上清液，並用新鮮培養基重懸細胞。
- 依適當密度接種到新培養瓶，並在推薦條件下培養。
冷凍保存指南
- 冷凍保存培養基: 冷凍保存培養基（產品編號 #TM024）或完整培養基 + 10% DMSO。
- 存儲條件: 細胞應存放於 液氮蒸氣相。
相關產品
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- 重組人 FGF2 – Z101455
- 重組人 BDNF – Z100065
- 重組人 GDNF – Z101055
- 重組人類 MIF (大腸桿菌) – Z100915
免責聲明
- 本產品 僅限於研究用途，不可用於人類或動物的治療應用。
- 所有測試參數和細胞特性均在標準培養條件下驗證，用戶實驗可能有所變化。
- 本產品購買可能需要 材料轉讓協議（MTA），請聯繫技術支持。
- 細胞的存活率 在發貨後 30 天內有保證，前提是依推薦指南存儲和處理。
- 使用者需確保在實驗室環境中進行 適當的生物安全預防措施。
參考文獻
- Scholz, Diana, et al. “Rapid, complete and large‐scale generation of post‐mitotic neurons from the human LUHMES cell line.” Journal of neurochemistry 119.5 (2011): 957-971.
