產品詳情
- 產品編號: T0457
- 包裝規格: 1 x 10⁶ 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 心臟 (心室心肌細胞)
- 供體資訊: 女性,心室
- 細胞類型: 永生化心肌細胞
- 生長特性: 貼附型,多極形態
- 永生化方式: 透過SV40T的慢病毒轉導
- 關鍵標記: GATA-4、ACTN2、ACTN3、MYH2、嘌呤黴素抗性
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: 液態氮氣相 (< -130°C)
- 運輸條件: 乾冰冷凍運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
- 適用範圍: 僅供研究使用,不適用於人體或治療用途
概述
永生化人類心肌細胞 – SV40T 為研究心肌細胞生物學提供了一個穩定的細胞模型。這些細胞經過永生化處理,可維持長時間增殖,同時保有心肌細胞的特異性標記與功能。適用於心血管研究,包括訊號傳導研究、藥物測試及心臟毒性評估。
主要特點與優勢
- 長期穩定培養: 永生化細胞可持續增殖,不會衰老
- 高實驗重複性: 保證實驗結果的一致性
- 生理相關模型: 表達關鍵心肌細胞特異性標記
- 最佳化培養條件: 適應特定培養基與細胞外基質,提高存活率
- 貼附型細胞: 易於處理與維護,可適用於標準培養環境
培養與操作指南
建議培養條件
- 培養基底塗層: 使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422),以增強細胞貼附能力。
- 培養基: PriGrow I (TM001),並添加以下成分:
- 10% 胎牛血清 (FBS)
- 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
- 培養條件: 37°C,5% CO₂ 濕潤環境。
- 接種密度: 20,000 – 30,000 細胞/cm²
- 倍增時間: 25-35 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞 (最長不超過 2 分鐘),並確保瓶蓋保持在水面以上,避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭外部進行消毒,然後轉移至生物安全櫃內操作。
- 將解凍後的細胞轉移至 15mL 無菌離心管,加入 5mL 預熱的完整培養基。
- 以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸取上清液,小心重懸細胞沉澱於新鮮的完整培養基中,並接種至預塗層的 T25 培養瓶。
- 按推薦條件培養,待細胞恢復生長後再進行操作。
傳代指南
- 吸取舊培養基,並以 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液,置於 37°C 培養箱內,直到細胞脫落 (~2-10 分鐘)。
- 加入等體積完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 以 125xg 離心 5 分鐘,吸取上清液,並將細胞重懸於新鮮培養基中。
- 按適當密度接種至新培養容器中。
- 按推薦條件培養,觀察細胞融合度。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液:使用冷凍保存液 (TM024) 或完整培養基加 10% DMSO。
- 冷凍方法:以 -1°C 每分鐘的速率降溫,然後轉移至液態氮儲存。
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免責聲明
- 本產品僅供 研究使用,不可用於治療、診斷或臨床應用。
- 細胞性能可能因使用者的培養條件不同而有所變化,請確保遵循建議培養條件。
- 產品需按照提供的儲存條件進行保存,以確保最佳性能。
- 使用者需自行確認本產品是否適用於其特定研究應用。
- 所有銷售均為最終交易,符合特定條件時可申請活細胞替換。
參考文獻
- Durham, Kristina K., et al. “HDL protects against doxorubicin-induced cardiotoxicity in a scavenger receptor class B type 1-, PI3K-, and Akt-dependent manner.” American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology 314.1 (2018): H31-H44.
- Kono, Ken, et al. “Development of selective cytotoxic viral vectors for concentration of undifferentiated cells in cardiomyocytes derived from human induced pluripotent stem cells.” Scientific reports 9.1 (2019): 3630.