產品詳情
- 產品編號： T0259
- 包裝規格： 1 x 10⁶ 細胞 / 1.0 mL
- 物種： 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源： 大腦
- 細胞類型： 永生化腦微血管內皮細胞
- 生長特性： 貼附型，多邊形形態
- 永生化方法： SV40 大 T 抗原轉導
- 生物安全等級： BSL-2
- 儲存條件： 液態氮氣相或低於 -130°C
- 運輸條件： 乾冰運輸
- 產品形式： 冷凍保存細胞
概述
永生化人類腦微血管內皮細胞 – SV40 提供了一個穩定且可重複使用的平台，用於體外研究腦內皮功能。這些細胞經過基因改造，以表達 SV40 大 T 抗原，從而允許長時間培養並維持內皮細胞特性。這些細胞適用於神經退行性疾病研究、中樞神經系統藥物通透性測試及血腦屏障建模。
主要特點與優勢
- 長期穩定性： 永生化技術確保長時間培養而不會衰老。
- 實驗重複性高： 可確保可靠且一致的實驗結果。
- 適用於神經血管研究： 可用於研究血腦屏障、神經發炎及中樞神經系統藥物輸送。
- 優化培養條件： 適應特定培養基及細胞外基質，提高存活率。
- 貼附型生長特性： 便於操作與維護。
培養與操作指南
建議培養條件
- 基底塗層： 使用 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299) 或 Applied Cell 細胞外基質 (G422) 以促進細胞貼附。
- 培養基： 使用 PriGrow I (TM001) 並添加：
- 10% 胎牛血清 (FBS)
- 1% 青黴素/鏈黴素 (G255)
- 培養條件： 37°C，5% CO₂ 濕潤環境。
- 接種密度： 25,000 – 30,000 細胞/cm²
- 倍增時間： 18 – 24 小時
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞 (最長不超過 2 分鐘)，確保瓶蓋保持在水面以上以避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭外部進行消毒，然後轉移至生物安全櫃內操作。
- 將解凍後的細胞轉移至 15mL 無菌離心管，加入 5mL 預熱的完整培養基。
- 以 125xg 離心 5-7 分鐘。
- 吸取上清液，小心重懸細胞沉澱於新鮮的完整培養基中，並接種至預塗層的 T25 培養瓶。
- 按推薦條件培養，待細胞恢復生長後再進行傳代。
傳代指南
- 吸取舊培養基並以 PBS 清洗細胞。
- 加入 2-3 mL 預熱的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，置於 37°C 培養箱內，直到細胞脫落 (~2-10 分鐘)。
- 加入等體積完整培養基以中和胰蛋白酶。
- 以 125xg 離心 5 分鐘，吸取上清液，並將細胞重懸於新鮮培養基中。
- 按適當密度接種至新培養容器中。
- 按推薦條件培養，觀察細胞融合度。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液：使用冷凍保存液 (TM024) 或完整培養基加 10% DMSO。
- 冷凍方法：以 -1°C 每分鐘的速率降溫，然後轉移至液態氮儲存。
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免責聲明
- 本產品僅供 研究用途，不得用於診斷或治療。
- 產品性能依使用者的培養條件及實驗設計而異。
- 使用時應遵循實驗室安全操作規範。
- 細胞應由受過專業培訓的技術人員進行處理，並保持無菌操作環境。
- 公司不對本產品在研究用途以外的適用性做任何保證。
參考文獻
- Yang, Sung-Hyun, et al. “Synthesis and biological evaluation of S-lipidated lipopeptides of a connexin 43 channel inhibitory peptide.” RSC Medicinal Chemistry 11.9 (2020): 1041-1047.
