永生化人類肥大細胞 (LUVA) ;不具顯著組織胺釋放(脫顆粒)能力 – T0843

一個可靠的肥大細胞模型,具有限制性的 FcεRI 表現與低度脫顆粒能力,適合用於免疫學與藥物研究。

分類

產品詳情

  • 產品編號: T0843
  • 包裝規格: 1×10^6 細胞 / 1.0 ml
  • 物種: 人類 (Homo sapiens)
  • 組織來源: 外周血
  • 細胞類型: 永生化肥大細胞
  • 生長特性: 懸浮生長;可能附著於非直立式培養容器
  • 生物安全等級: BSL-2
  • 儲存條件: 液態氮氣相或低於 -130°C
  • 運輸條件: 乾冰運輸
  • 產品形式: 冷凍保存細胞
  • 培養條件: 37°C,5% CO₂
  • 永生化方法: 自發性

產品概述

LUVA 細胞株由 CD34⁺ 前驅細胞建立,培養條件包含 幹細胞因子 (SCF)、IL-6 以及短期的 IL-3。細胞內含具 染色質顆粒,對 tryptase、cathepsin G、carboxypeptidase A3 呈陽性反應,並表現 FcεRI、c-kit、chymase、histidine decarboxylase、CPA3 以及半胱氨酸白三烯受體 1 等相關轉錄因子。

LUVA 細胞能在無 SCF 的條件下維持生長,且保留 c-kit 與 FcεRI 訊號功能。雖然 FcεRI 陽性細胞比例僅約 5%,但仍具有限度的組織胺釋放能力。相較於 LAD2 等高脫顆粒細胞株,LUVA 提供一個可重現且可控的肥大細胞研究模型,適合免疫學與藥物開發相關應用。

主要特點與優勢

  • 明確來源:由一名阿斯匹靈加重呼吸道疾病患者的 CD34⁺ 單核細胞衍生。
  • 顆粒標誌特性:對 tryptase、cathepsin G 及 carboxypeptidase A3 呈陽性反應。
  • 訊號功能完整:保留 c-kit 與 FcεRI 受體的訊號活性。
  • 不依賴 SCF 培養:無需外加 SCF 即可穩定生長。
  • 選擇性且可靠:FcεRI 表現受限、脫顆粒能力低,提供穩定且可再現的研究模型,適用於免疫學與藥物研究。

培養與操作指南

建議培養條件

  • 培養器材: SpheroWell™ T75 培養瓶 (G7543) 或直立式 PriCoat™ T25 培養瓶 (G299)。
  • 培養基: PriGrow X Series 培養基 (TM0843) 添加:
    • 2 mM L-谷氨醯胺 (G275)
    • 1% 青黴素/鏈黴素溶液 (G255)
  • 培養環境: 37°C,5% CO₂ 濕潤培養箱。
  • 接種密度: 100,000 – 300,000 細胞/ml。
  • 倍增時間: 約 24-48 小時。
  • 注意事項:請勿使用 FBS 進行培養或冷凍保存

解凍步驟

  1. 將細胞於 37°C 水浴中快速解凍(≤ 2 分鐘),瓶蓋保持在水面以上。
  2. 以 70% 酒精消毒瓶身後,置於生物安全櫃中操作。
  3. 將細胞懸液轉移至含 5 mL 預溫完全培養基的 15 mL 無菌離心管。
  4. 以 125×g 離心 5–7 分鐘,棄去上清。
  5. 將細胞重懸於新鮮培養基中,轉入 T75 培養瓶中培養。

傳代指南

  • 每 2–3 天更換培養基,並保持細胞密度 ≤ 1 × 10⁶ cells/mL。
  • 當細胞達適當密度時,以 1:2 – 1:20 的比例進行傳代(1:10 約 3–4 日達融合)。
  • 以 125×g 離心 5 分鐘,重懸於新鮮培養基後轉入新培養瓶。

冷凍保存指南

  • 冷凍保存液:使用完整培養基 (TM0843) 添加 8% DMSO 進行冷凍保存。
  • 冷凍過程:以 -1°C/分鐘的速率緩慢降溫,然後轉移至液態氮儲存。

相關產品

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免責聲明

  • 本產品僅供研究使用, 不得用於人類或動物的診斷、治療或臨床應用。
  • 使用者需確認本產品是否適用於其特定的實驗條件。
  • 處理與使用本產品時,應遵循所有相關的生物安全法規。
  • 本公司不提供任何明示或暗示的擔保,針對本產品於推薦條件之外的應用不承擔任何責任。

參考文獻

  • Kirshenbaum, Arnold S., et al. “Demonstration that human mast cells arise from a progenitor cell population that is CD34+, c-kit+, and expresses aminopeptidase N (CD13).” Blood, The Journal of the American Society of Hematology 94.7 (1999): 2333-2342.
  • Kirshenbaum, Arnold S., et al. “Characterization of novel stem cell factor responsive human mast cell lines LAD 1 and 2 established from a patient with mast cell sarcoma/leukemia; activation following aggregation of FcεRI or FcγRI.” Leukemia research 27.8 (2003): 677-682.
  • Laidlaw, Tanya M., et al. “Characterization of a novel human mast cell line that responds to stem cell factor and expresses functional

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