產品詳情
- 產品編號: T0086
- 包裝規格: 1×10⁶ 細胞 / 1.0 ml
- 物種: 人類 (Homo sapiens)
- 組織來源: 外周血液
- 捐贈者資訊: 健康人類供者(匿名)
- 細胞類型: 永生化 T 細胞
- 生長特性: 懸浮生長,形成圓形細胞團塊
- 永生化方式: 透過 Lenti-hTERT(LV616)及 Lenti-Rb siRNA(LV621)慢病毒轉導
- 表達標誌: CD3 及 HLA-27
- 生物安全等級: BSL-2
- 儲存條件: 低於 -130°C(液態氮氣相)
- 運輸條件: 乾冰運輸
- 產品形式: 冷凍保存細胞
概述
永生化人類 T 細胞(T0086)經基因工程修飾,可無限增殖,同時維持其免疫特性,適合作為標準化研究模型。該細胞廣泛應用於 T 細胞活化、免疫訊號傳導 及 適應性免疫反應 研究,並在 免疫治療、CAR-T 開發及疫苗研究 等前臨床研究領域發揮重要作用。
主要特點與優勢
- 穩定的 T 細胞模型 – 維持 T 細胞關鍵功能,適用於免疫研究。
- 免疫應答分析 – 用於研究 T 細胞活化、訊號傳導及細胞交互作用。
- 可擴增性 – 適合 大規模生產,支援高通量功能及基因分析。
- 前臨床應用 – 廣泛用於 免疫療法、CAR-T 技術開發及疫苗測試。
- 高穩定性與再現性 – 減少實驗間的變異性,確保數據穩定。
培養與操作指南
建議培養條件
- 培養容器:T12.5 培養瓶為最佳選擇,避免使用超過 25 cm² 表面積的培養容器。
- 培養基:PriGrow X 系列培養基 (TM0086) 加 1% 青黴素/鏈黴素 (G255)。
- 培養條件:37°C,5% CO₂ 濕潤環境。
- 細胞活化:解凍後需添加 Immunocult Human CD3/CD28 T Cell Activator (Stemcell, Cat. No. 10971)。
解凍步驟
- 在 37°C 水浴中快速解凍細胞 (最長不超過 2 分鐘),確保瓶蓋保持在水面以上以避免污染。
- 使用 70% 酒精噴灑並擦拭外部消毒,然後移至生物安全櫃內操作。
- 將解凍後的細胞加入 15 mL 無菌錐形管中,並添加 5 mL 預熱的完整培養基 (含 10% FBS)。
- 以 125xg 離心 5 分鐘,小心吸取上清液。
- 重懸細胞沉澱於 1 mL 預熱的完整培養基中,並轉移至 T12.5 培養瓶,添加 3 mL 培養基。
- 每 mL 培養液中加入 25 µL CD3/CD28 活化劑。
- 按推薦條件培養,細胞應靜置培養至少 3 天,健康細胞會形成圓形團狀。
傳代指南
- 當培養瓶達到 80-90% 匯合時進行傳代。
- 若有需要可轉移至 T25 培養瓶,但避免使用更大培養容器。
- 傳代方法:
- 方法 1:直接添加新鮮培養基至培養瓶中。
- 方法 2:轉移一半的細胞至新培養瓶,並向兩個培養瓶中分別添加新鮮培養基。
- 若細胞生長變慢,可補充 20 ng/mL IL-2 並培養 3 天。如生長遲緩持續,可重複此步驟。
- 注意:傳代過程中避免離心操作。
冷凍保存指南
- 冷凍保存液:TM024 或 50% 完整培養基、40% FBS 和 10% DMSO。
- 冷凍方法:以每分鐘 -1°C 的速率降溫後,轉移至液態氮儲存。
相關產品
- 重組人類 IL-2(E. coli)– Z100485
- 重組人類 IL-7(E. coli)– Z100975
- 重組人類 IL-10 – Z101495
- 重組人類 TGF-β1 – Z101555
免責聲明
- 本產品僅供 研究用途,不得用於診斷、治療或臨床應用。
- 產品數據來自標準化測試條件,不同實驗條件可能影響結果,使用者應自行驗證產品適用性。
- 本產品的銷售及使用須遵循相關國內外法規及研究用途規範。
- 可提供活細胞運輸,但需評估目的地溫度及運輸條件,額外費用另計。
- 本公司對於超出產品規格書所述範圍的應用或錯誤使用,不承擔任何責任。